临床实验室纯化水标准与操作指南

临床实验室中试剂的配制、校准品与质控品的复溶以及仪器清洗等环节均需使用纯化水。本文系统梳理了临床实验室试剂所用纯化水的相关术语与定义、水质要求、适用性确认、检验方法及日常监测频率等内容。

一、实验室用纯化水的等级

1.分析实验室用水应以饮用水或适当纯度的水为原水，一般分为三个等级：一级水、二级水和三级水。

1.一级水：适用于对水质有严格要求的分析实验，尤其包括对颗粒物有控制的检测项目，如高效液相色谱分析。通常可通过将二级水经石英蒸馏装置再蒸馏，或经混合离子交换床处理，并最终通过0.2μm微孔滤膜过滤而制得。

2.二级水：适用于无机痕量分析类实验，如原子吸收光谱分析。可通过多次蒸馏或离子交换法等工艺制备。

3.三级水：适用于常规化学分析实验，可通过反渗透、蒸馏或离子交换等方法制取。

4.二、相关术语与定义

1.纯化水：指未添加任何杂质或添加剂的水。在临床实验环境中，常指通过反渗透、蒸馏或离子交换等方式制得的去离子水，其电导率一般低于10 μS/cm（25℃），即电阻率大于0.1 MΩ·cm（25℃）。

2.电阻率：指在标准温度（通常为25℃）下，1 cm³水溶液在其对立面之间测得的电阻值，常用ρ表示，单位为Ω·cm。

3.电导率：是描述物质导电性能的物理量，为电阻率的倒数，常用单位包括mS/m或μS/cm。

4.总有机碳（TOC）：指水中所有有机物质中含碳量的总和，包括易被强氧化剂分解的有机物及需特殊方法氧化的有机物。

5.微粒性物质：指除气体外，以非液态形式分散于水中构成非均相混合物的物质。

6.试剂用纯化水：指用于临床实验室常规试剂配制、校准品与质控品复溶等实验用途的纯水。

7.三、试剂用纯化水的基本要求

外观：应为无色透明澄清液体，无任何异味。

电阻率：应不低于10 MΩ·cm（25℃），或电导率不超过0.1 μS/cm（25℃）。

总有机碳：TOC应小于500 ng/g（即500 ppb）。

微生物总数：应低于10 CFU/mL。

微粒数：直径超过0.22 μm的微粒应不可检出（＜1个）。

易氧化物检验：取100 mL水样，加入10%稀硫酸10 mL，煮沸后添加0.10 mL 高锰酸钾滴定液（0.02 mol/L），继续煮沸10分钟，粉红色不应完全褪去。

四、特殊试剂用纯化水的附加要求

1.如试剂生产有特殊需求（如血细胞计数试剂对微粒有特殊限制，分子生物学试剂要求无DNA酶、RNA酶或蛋白酶等），应参照相应标准或制定特定规范。如无明确标准，可参考以下要求：

电阻率不低于18 MΩ·cm（25℃）；

TOC低于10 ng/g（ppb）；

微生物总数＜10 CFU/mL；

直径大于0.22 μm的微粒应不可检出。

五、试剂用纯化水的适用性确认

1.即使水质符合基本标准，实验室仍需验证其是否适用于具体检测方法。可采用以下方法进行确认（可选一种或多种）：

1.将水样作为空白样品检测，应无信号响应或结果为零；

2.用水配制试剂或培养基，对标准品、校准品或既往病人样本进行检测，结果应符合预期；

3.若适用，用水配制质控品，其结果应与经确认用水所配制质控品结果一致；

4.可采用的确认用水包括：不同批号已确认纯水、系统消毒前制备并存贮适当的纯水、其他来源或纯水系统提供的经验证纯水；

5.查阅实验室质控记录，确认水质满足临床检测的质量要求。

6.六、检验方法与监测频率

感观检测：应每日进行目视和嗅闻检查，确保水质澄清、无色、无臭。

电导率/电阻率检测：按GB/T 11446.4执行，应在每次实验时进行在线或离线检测。电导仪需每年至少校准一次。

注：所用仪器包括：

a.电导仪：使用交流信号，频率范围25–100 Hz；

b.电导池：常数一般在0.01 cm⁻¹至0.1 cm⁻¹之间，需根据水样电导率选择合适常数的电导池；

c.温度计：量程0–35℃，精度0.1℃；

d.恒温水浴：控制温度在25℃ ± 0.1℃。

总有机碳（TOC）检测：按GB/T 11446.8执行，可每年委托有资质的实验室进行检测。

注：设备包括：

a.总有机碳分析仪（含CO₂检测器与记录仪）；

b.不含二氧化碳水制备装置（依GB/T 603-2002）；

c.进样器（5 μL、10 μL、50 μL等规格）；

d.各类玻璃器皿；

e.分析天平（精度0.1 mg）。

细菌总数检测：按GB/T 11446.10执行，建议每月外包检测一次。